Prof. Dr. Ii Sei Watanabe

  • Professor Titular (RDIDP) ICB/USP.
  • Biomédicas III – Cidade Universitária, Laboratório de Microscopia Eletrônica
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  • Currículo Lattes:  

Linha de pesquisa

Estudo da ultra-estrutura das terminações nervosas, fibras musculares, tecido conjuntivo, células acinares e epiteliais, empregando os métodos de microscopia eletrônica de transmissão e de varredura de alta resolução, imunohistoquímica e histoquímica, em animais jovens, adultos e com envelhecimento.

Descrição

Dentro destas linhas de pesquisa estudamos os aspectos de biologia celular das células epiteliais, musculares, acinares e terminações nervosas comparando os ani mais jovens, adultos e com envelhecimento. São utilizados ratos Wistar, de ambos os sexos, com idade de recém-nascidos até 2 anos. Os tecidos de cada animal serão removidas e fixadas em solução de Bouin durante 48 horas para o exame histólogico. Serão utilizadas as colorações de Hematoxila-Eosina, Azo-Carmin e Picro-Sirus. Os cortes corados com Picro-Sirus serão observados através de luz polarizada para a observação das fibras colágenas do tecido conjuntivo que envolve os agrupamentos de tecidos conforme trabalho de Junqueira et al. (1979). Para a microscopia eletrônica de varredura da alta resolução os tecidos dissecados são fixados em solução de tetróxido de ósmio a 2% por 2 horas à uma temperatura de 4ºC. Em seguida, as peças serão lavadas em solução tampão fosfato de sódio a 0,015M durante 8 horas e posteriormente tratadas em solução aquosa de “dimetil sulfóxido” – a 25% e 50%, e as fraturas são efetuadas em nitrogênio liquido. As peças serão fraturadas utilizando o nitrogênio liquido, sobre uma placa metálica com auxílio de cinzel e martelo. As peças fraturadas serão devolvidas para a solução de DMSO a 50% para proceder o descongelamento e tratamento de acordo com a técnica descrita por Tanaka (1989) e Watanabe et al. (1992). Para a observação do tecido conjuntivo, os tecidos serão fixados em solução de Karnovsky modificada, tratados com solução de NaOH numa concentração de 10% conforme a técnica de Ohtani (1987). Em seguida, as amostras serão lavadas em água destilada, desidratadas em série crescentes de álcoois a partir de 60% até o absoluto. A secagem de todas as amostras será realizada em aparelho de ponto critico Balzers, CPD-030 e posteriormente, as mesmas serão montadas em bases metálicas utilizando uma camada de esmalte, cobertas com íons de ouro em aparelho “Íons Sputter” Balzers Unions-SCD-040. Para a microscopia eletrônica de transmissão os tecidos serão fixados em solução de Karnovsky modificada, contendo 2,5% de glutaraldeído, 2% paraformaldeído em solução tampão fosfato de sódio a 0,1M (pH7,4) a 4ºC por 3 horas, de acordo com o método descrito por Watanabe e Yamada (1983). O material será incluído em resina Spurr e mantido por 3 dias em estufa a 60ºC. Cortes espessos serão realizados para a localização da área de interesse com o uso de faca de vidro e ultramicrótomo Ultra-Cut Reichert. Cortes ultra-finos serão obtidos com a faca de diamante, coletados em telas de 200 e 300 “mesh” e posteriormente contrastados com solução alcoólica de acetato de uranila a 4% (Reynolds, 1963) e citrato de chumbo a 0,4% (Watson, 1958) e examinadas em microscópio de eletrônico de transmissão Jeol JSM-1010, do Centro de Microscopia Eletrônica do Instituto de Ciências Biomédicas. Outros métodos modernos podem ser utiulizados na medida das necessidades. Através destes métodos serão elucidados principalmente a constituição do tecido e de elementos celulares, enfocando os aspectos morfofuncionais das células.

Principais trabalhos publicados

  • Watanabe, I.; Haemmerle, C.A.S.; Dias, J.D.; Issa, J.P.M.; Cury, D.P.;Takada, S.H.; Sosthenes, M.C.K; Silva, M.C.P.; Campos, L.M.G.; Nogueira,M.I.; Iyomasa, M.M. Immunohistochemistry and ultrastructural characteristics of nerve endings in the oral mucosa of rat. Journal Electron Microscopy, 62:259-270, 2012, Oxford, On-Line, setembro 2012.
  •  Watanabe, I.; Haemmerle, C.A.S.; Dias, J.D.; Cury, D.P.; Silva, M.C.P.; Sosthenes, M.C.K; Santos, T.C.; Guimarães, J.P.; Miglino, M.A. Structural characterization of the Capybara tongue by light, scanning and transmission electron microscopy. Microscopy Research and Technique, 76: 184-195, 2012.
  • Rigoglio,N.N.; Fátima, L.A.F.; Hanassaka, J.Y.; Pinto, G.L.;Machado, A.S.D.; Gimenes, L.U.; Baruselli, P.S.; Rennó, F.P.; Moura, C.E.B.; Watanabe, I.; Papa,PC.     Equine chorionic gonadotrophin alters luteal cell morphological features related to progesterone synthesis. Theriogenology, 79:673-679, 2013.
  •  Ciena, A.P.;Bolina, C.A.S.; Almeida, S.R.Y.; Rici, R.E.G.; Oliveira, M.F.; Slva, M.C.P.; Miglino, M.A.; Watanabe, I. Structural and Ultrastructural features of the Agouti tongue (Dasyprocta aguti Linnaeus, 1766). Journal of Anatomy,On-line, maio-2013.
  •  Watanabe, I.; Ogawa, K.; Cury, D.P.; Dias, F.J.; Sosthines, M.C.K.; Issa, J.M.; Iyomasa, M.M.  Fine structure of bacterial adhesion to the epithelial cell membranes of the filliform papillae of tongue and palatine mucosa of Rodents: a morphometric, TEM and HRSEM study. Microscopy research and Technique, 76: 1226-1233, 2013.
  • Dias, F.J.; Issa, J.P.M.; Iyomasa, M.M.; Coutinho-Neto, J.;Calzzani, R.A.J.; Iyomasa, D.M.; Sousa, L.G.; Almeida, S.R.Y.; Cury, D.P.; Watanabe, I.  Application of low-level laser theraphy and the purified protein from natural latex (Hevea brasiliensis) in the controlled crush injury of the sciatic nerve of rats: morphological, quantitative and ultrastructural study. Biomedical Research International, article ID 597863,  2013.
  • Iyomasa, M. M.; Leão, J.C.; Rizzi, E.C.; Issa, J. P. M.; Dias, F.J.; Watanabe, I; Iyomasa, D. M. Ultrastructure and Light Microscope Analysis of Intact Skin After a Varying Number of Low Level Laser Irradiations in Mice. Biomedical Research International, article ID 506051, 2014.
  •  Campos, L.M.; Cruz-Rizzolo, R.J.; Watanabe, I; Pinato, L.;Nogueira, M.I. Efferent projections of the suprachiasmatic nucleus based on the distribution of vasoactive intestinal peptide (VIP) and arginine vasopressin (AVP) immunoreactive fibers in the hypothalamus of Sapajus apella. Journal of Chemical Neuroanatomy,13:42-53, 2014.
  • Dinardo,C.; Venturini,G.; Zhou,E-H.; Watanabe,I.; Campos,L.; Dariolli,R.; Motta-Leal-Filho, J.; Carvalho, V.; Cardozo, K.; Krieger, J.; Alencar, A.; Pereira, A. “Variation of mechanical properties and quantitative proteomics of VSMC along the arterial tree”. Am. Journal  Physiol. Heart Circulatory Physiology, 306: H505-H516, 2014.
  • Vignardi, C. P.; Hasue, F. M.; Sartorio, P. V.; Margonato, C. C.; Machado, A. S. D; Passos, M. J. A. C.; Santos, T. C. A.; Nucci, J. M.; Watanabe, I.; Gomes, V.; Phan, V. N. Genotoxicity, potential cytoxicity and cell uptake of titanium dioxide nanoparticles in the marine fish Trachinotus carolinus (Linnaeus, 1766). Aquatic Toxicology,On-line/2014.
  • Silva J.T., Santos F.M., Giardini A.C., Martins D.O., Oliveira M E, Ciena A.P., Gutierrez V.P, Watanabe I., Britto L.R.G.; Chacur M. Neural mobilization promotes nerve regeneration by nerve growth factor and myelin protein zero increased after sciatic nerve injury. Growth Factors, ON-LINE:1-6 – DOI 10.3109/08977194.2014953630, 2014
  •  Takada, S.H.; Haemmerle,C.A. dos S.; Lee, V.Y.;Takase, L.F.; Kihara, A.H. Watanabe, I.; Nogueira,M.I.. Different morphological features in acute hippocampal cell death after neonatal anoxia. Neuroscience, 284: 247-259, 2015.
  • Barreiros, V.C.P.; Dias, F.J.; Iyomasa, M.M.; Coutinho-Netto, J.; Sousa, L.G.;  Fazan, V.P.S.; Antunes, R.S.; Watanabe, I.; Issa, J.P.M. Morphological and morphometric analyses of crushed sciatic nerves after application of a purified protein from natural latex and hyaluronic acid hydrogel. Growth Factors, 32: 164-170, 2014.

Livros

  • Watanabe, I. Scanning Electron Microscopy Atlas of Cells and Tissues of the Oral Cavity. 1th edition. FAPESP and CNPq, 1998.
  • Watanabe, I. Microscopia Eletronica de Varredura de Alta Resolução: Células e Tecidos. Editora Paulus, 2007.
  • Watanabe, I. Erhart: Elementos de Anatomia Humana. Editora Atheneu 10 edição, 2009.